pcr实验室防护着装要求

pcr 实验室防护着装的标准要求是：

pcr实验室设计标准 pcr实验室的一般设计原则

pcr实验室设计标准 pcr实验室的一般设计原则

个人防护要戴带一次性帽子、佩戴医用N95、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、一层乳胶手套、外层一次性隔离衣、防护目镜、第二层乳胶手套。

注意：（该实验区主要进行的作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。2）免疫区穿戴完毕后应尽快通过缓冲间或者走廊,进入提取区。

规范化的pcr实验室应注意哪些

1、建立样品准备区

这个区域专门用作样品的准备，在制备和作用于提取的试剂时应该采取预防措施：⑴PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间作。⑵组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理，以根据应用的需要提取DNA或RNA。⑶用于样品处理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作作靶序列。⑷DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管作，以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。⑸大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。⑹管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生，而且管子不能用力崩开，这样会产生气溶胶。⑺任何时候都应该穿实验服和带手套，手套要经常更换，尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间，经常清洗。

2、样品准备和RNA-PCR RNA-PCR的额外步骤需要额外的样品作，这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题，反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防止污染的方法也有。

该去专门用于准备各种反应，这个区域必须保持干净，而且没有来自克隆和样品准备的污染。5、在前PCR区建立PCR混合物。前PCR区必须要有试剂和准备，特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管。

4、PCR实验室试剂的作。

⑴所用的所有溶液都应该没有和（或）酶（DNase和RNase）污染。⑵所有PCR试剂中使用的水都应该是高质量的－新鲜蒸馏的去离子水，用0.22μm过滤的，并且是高压灭菌。⑶在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂，在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。⑷所用试剂都应该以大体积配制，实验一下看试剂是否满意，然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。⑸所有试剂和样品准备过程中都要使用一次性灭菌的瓶子和管子。⑹新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。⑺样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。

⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃，在实验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。⑵如果你的实验室使用多套引物，以致于配制包括所有试剂的单一反应混合物不够经济，可以考虑分装保存够一天的PCR成分。⑶作为一个规则，应该保存一套阴性、弱阳性和强阳性对照样品来分析样品配制和PCR前过程的效率和洁净程度。而且，你也希望通过使用一个已知的弱阳性样品来验证你的样品缓冲液以证明里面不含扩增抑制物。⑷阴性样品要与每组样品同时做，以分析是否存在样品与样品之间的污染以及是否存在PCR产物的污染，阴性对照应该包括以外的所有试剂。⑸当做阳性对照时，有两个理由决定了应该使用最少数量的。⑹由于必须有对照反应，对照模板的特点应该予以考虑。

6、控制污染的3.污洗间方法。

已设计出很有力的酶学方法用来消除一种形式的污染—使用UNG，这一技术能有效地消除由PCR产物引起的污染。另一种控制污染的方法是使用紫外线，这种方法不能完全消除污染问题，但可以将污染降低几个数量级。

7、后PCR区PCR完成以后，需要分析样品并解释数据，应该留出一个专门用于反应后处理样品的地方。后PCR活动中使用的所用试剂、一次性耗材和仪器都必须是专门用于这一目的，决不能把实验室这一区域的试剂或仪器用于任何前PCR活动

实验室设计与建设指南的介绍

设备多，电脑端出数据，省去人工检测时间，高效率出报告结果

黄家声主编的《实验室设计与建设指南》共设计了七个章节，章介绍21世纪的化实验室模式，描述化实验室的概念与未来；第二章介绍实验室的种类并展示了各行业实验室的大量精美；第三章介绍实验室设计基础，包括设计规范、设计流程、实验室模块、空间标准、实验室装备、灵活式实验室、实验室标识设计；第四章阐述实验室系统工程，包括实验室通风、空调、洁净、环保、供气、给排水、纯水、供电、智能化、安全防护、管道系统；第五章介绍常规实验室设计，包括化学实验室、分析仪器室、气瓶室、天平室、高温室、品室、洗涤室的设计与说明；第六章介绍特种实验室设计，展示了微生物实验室、PCR实验室、HIV实验室、生物安全实验室、动物实验室的设计及说明；第七章属于实验室设计应用，以实验楼整体设计为案例，全面剖析实验室设计，并阐述实验室设计与建设中的常见问题，分享实验室设计作品。

为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。 各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。

如何建立实验室？检测实验室怎么建设？

3、消毒

检验科拥有专业的检验技术人员，配备先进的设备，检验科用真实、准确、及时数据报告，告诉患者诊断真相，但在建设上少不了需要关注的细节：

灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。

一、医院检验所项目及其介绍

专注于血液、寄生虫、肝功能、血脂、激素、自体溶血等检测核查项目

生化组、免疫组、微生物组、临检检查项目组等

2.临检检查项目

血液一般检查、血液寄生虫、尿液检查、粪便检查、体液及脑脊液检查等

3.免疫生化检查项

肝功、肾功、心肌酶谱、血脂、糖尿病监测、离子检查、激素检查等

二、检验科室建设设计遵循原则

1.洁净区-半污染区-污染区

2.-物流-污物流

改造在原有基础上，限度地实现了实验室分区布局的合理化、规范化，进一步确保生物安全，极大地改善了工作环境，大大提高了工作质量和工作效率。

三、检验科建设功能区布置

1.生化免疫区建设

（1）生化检测区

建设要点：两区性质不多，可合并成一间科室

2. 微生物区建设

培养的真菌转移到鉴定室，为了安全，放在生物安全柜内作

建设要点：有预算可设置真菌实验室

建设要点：隔墙平整不积尘，好清洁

4.PCR实验室建设

四区（试剂准备区、标本制备区、基因扩增区、产物分析室）分隔状态，防止污染

规划事项：走廊，标本制备区工作量大，面积对比其他区更大

5. 临检区建设

常规血、尿、粪便常规检测

规划事项：划分镜检室（医生需要安静

四、辅助区建设

1.库房

大量的试剂、耗材需要存放。

2.标本暂存室

48小时样本存放，没有次科室可放在临近室冰箱。

一次性容器需要在洗涤房消毒

4、UPS房

给大型仪器设备使用不间断供电。

5、纯水房

很多仪器设备需要使用纯水，所以需要纯水机房。

如何设计荧光定量PCR的引物及TaqMan探针

用专门的试剂盒来做吧，然后按照说明书作，挺方便的。我们实验室以前用的BIOG荧光定量PCR试剂盒，反应挺4.检验科实验室主要用于放置实验仪器，不应设置试剂架。盆柜通常应设置在墙壁的侧面，并且应在实验室中设置非手动洗手装置。灵敏的，实验结果也不错，而且染料法和探针法都有。

可以用引物设计软件，primer5就挺不错的。你是要检测DNA还是RNA？探针法检测DNA的话可以用BIOG SUPER PROBE KIT，检测RNA的话1.按一般检测划分可以用BIOG SUPER PROB ONE STEP KIT。

PCR实验作注意事项有哪些

1、必须在无菌无尘环境下进行作；

2、检测人员必须通过临检中心业务培训并取得合格证书；

在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外。

3、必须拥有标准的的PCR荧光实验室；

扩展资料

PCR实验特点：

1、灵敏度高：PCR实验产物的生成量是以指数方式增加的，能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU；在细菌学中最小检出率为3个细菌。

2、简便、快速：PCR实验反应一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

3、纯度要求低：不需要分离或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等DNA扩增检测。

参考资料来源：

如何设计建设标准的NGS实验室？

全自动化设备检测，出结果

SICOLAB实验室设计与建设

一、高通量测序（NGS）实验室简1、主体结构介

1.1 NGS实验室又叫高通量测序检测实验室。NGS是下一代测序技术( Next Generation Sequencing)即高通量测序技术的简称。高通量测序技术是对传统Sanger测序（称为一代测序技术）革命性的改变, 可同时对几十万到几百万条分子进行序列测定，同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能, 也称为深度测序(Deep sequencing)。

1.2 由于NGS技术对所检测的模板进行大量扩增，容易出现实验室污染导致检测结果准确性下降；另外NGS技术要求高、影响因素多，实验过程处理不当易导致检测结果准确性下降或检测失败。因此临床基因扩增检验实验室技术验收和规范化管理是NGS技术本身需要，也是在临床上顺利应用该技术前提。

二、NGS实验室临床应用的基本条件

2.1 必须拥有符合临检中心相关规定的标准NGS实验室。

2.2 检测设备必须符合标准NGS实验室设置要求：高通量测序仪及配套；高通量测序检测试剂盒；通用电脑；自动分析软件，实验室样本信息管理系统等。

2.3 检测人员必须通过专门的技能培训，并获得省级以上卫生计生行政部门颁发的临床基因扩增检验技术上岗证书。NGS实验室必须建立严格的实验室管理制度、建立标准化作程序（SOP）、建立系列质量管理文件等，确保实验室日常运行符合的要求，确保检测结果准确、确保实验室卫生安全，确保实验室长期稳定运行。

2.4 NGS临床应用必须在无菌无尘环境下进行作。

设计建设一个标准化的NGS实验室 | 喜格SICOLAB

主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。

2、标准的各区分隔和气压调节

将检测过程分成试剂准备、样本制备、PCR扩增和高通量测序四个的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个实验区设置有缓冲区， 同时各区通过气压调节，使整个检测实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。

可打开缓冲区和 PCR 扩增区的排风扇往外排气，在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口，空气通过回风口向室内换气。

在每个实验区和缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。在各区还设置移动紫外线灯，对实验桌进行局部消毒。

4、机械连锁不锈钢传递窗

试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。

5、地面

地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面，整体性好。便于进行清扫，耐腐蚀。没有条件的也可采用水磨石地面，或大块的瓷砖（至少800mm×800mm）接缝需要小于2mm。

6、照明

7、平面布局

NGS实验室应根据自己的检验项目、所采用的检测技术平台和工作量来决定分区的多少及各区域的空间大小，至少具体需要多少个区，同样是“个体化”的，以“工作有序、互不干扰、防止污染、报告及时”作为基本原则。

pcr实验室分为哪四个区?

PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中，常见的有以下几种污染类型：扩增产物的污染；天然基因组DNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染，实验就必须停止，直到找到污染源为止，而且实验结果必须作废，需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐，浪费人力物力。因此要避免污染，首先应是预防，而不是排除。

PCR扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。

3.HIV初筛实验室建设

PCR原理

DNA的半保留是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则成同样的两分子拷贝。

但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。

PCR实验室建设中的关键控制点

（1）临床基因扩增检验实验室的技术人员必须进行上岗培训，经培训合格后才能从事临床基因扩增检验的工作；

PCR Laboratory Critical Control Point)：

1 实验室空调通风系统设计及压力控制

PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全排的气流组织形式。同时，要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。

1.1 试剂贮存和准备区

对与气流压力的控制，本区并没有严格的要求。

1.2 标本制备区

该区域主要进行的作为临床标本的保存、(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。

本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外，由于在加样作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。

1.3 扩增反应混合物配制和扩增区

该区域主要进行的作为DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区内进行。

本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别作如加样等应在超净台内进行。

1.4 扩增产物分析区

该区域主要进行的作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测，此区域可不设。

本区是最主要的扩增产物污染来源，因此对本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

2 污染的预防与控制

2.1 工作区域的严格划分

（1）各个实验区域设置合理；

（2）各个实验区域要有明显的标记（如醒目的门牌或不同的地面颜色等），以避免各个不同实验区域设备物品、试剂等发生混淆。

2.2 合理的系统设置

（1）合理的空调通风系统设置，尽量采用全送全排的空调系统；

（2）严格的气流压力控制，保证不同的实验区内不同的压力要求。

2.3 规范的作

（2）在实验作过程中，作者必须戴手套，并经常更换。此外，作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施；

（3）清洁工作及时、正确。实验工作结束后，必须立即对本区进行清洁。除常规的消毒液体对表面进行擦拭消毒或紫外线灯的照射消毒外，对一些实验设备还应进行高压消毒处理。

2.4 严格的管理

（1）严格控制进出实验室的人员。与实验无关的人员不得随意进出实验室，有条件的情况下要设置的通道和进出整个实验区的门；

（2）在各个实验区域使用带有明显区别标志的工作服（如不同颜色），当离开时不得将本区的工作服带至其它区域；

（3）尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。

（4）扩增产物分析区是最主要的扩增产物污染来源，废液不能在实验室中倾倒，必须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉，用过的吸头等一次3、建立前PCR区。性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理，如焚烧等；

（5）扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质，应特别注意实验人员的安全防护。

2.5 完备的实验室配套设施

完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件，应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器，如超净工作台、离心机、加样器等。

新建医院检验科实验室设计需要注意哪些地方？

防止造成污染，物流分开采4、后PCR区PCR完成以后，应该留出一个专门用于反应后处理样品的地方。用传递窗

新建的喜格-医院检验科实验室设计需要注意以下几点：

1.检验科实验室一般可分为：临床急检区、标本处理区、生化免疫区、血液分析区、细菌实验室，条件允许可开发PCR实验室、遗传基因实验室、放射免疫分析室。

2.检验科实验室应分为准备室、培养（接种）室、常规细菌室、清洁实验室，清洁实验室应达到万级洁净室标准。

3.检验科实验室血库还应分为三个区域（不少于两个）血液储存区域、血液匹配区域、血液发送区域。